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几种体细胞检测方法的对比

作者:哈罗德 文章来源:哈罗德 发布于:2018-05-15 09:16:36 点击量:

根据乳汁中体细胞数含量的多少来判断是否患有隐性乳房炎,是一种比较可靠的方法,目前在临床上应用的比例较高,常用的有乳汁体细胞直接计数法和间接计数法两种。


直接计数法就是通过直接计算每毫升牛乳中细胞数量的方法来评价奶牛的乳房炎发病情况。


如直接显微镜计数法(DMSCC),该方法检测成本低,但因操作人员经验水平和所处环境条件的不同,导致数据结果误差较大,且耗时长,不易掌握,不适合大批量快速检测。


目前较先进的是采用荧光流式细胞技术(FCM)对牛奶中的体细胞进行荧光染色处理的自动计数法。优点是快速、准确、误差小、重复性好,电脑自动计数并打印结果,目前已经有商业的仪器出售,该方法的缺点是需要专门的仪器设备,对于一些规模较小的养殖场(户)会增加成本。此外,虽然各个国家对体细胞计数法比较重视,但是有关的规定和标准却不尽相同,一般在200000~500000个/毫升以内为安全。


现在国内有很多显微镜与荧光技术相结合的产品,如DHC、牛博士等。优点是操作简单,缺点是需要耗材,且耗材较贵。


间接计数法比较著名的是加州乳房炎测试法(CMT),其原理是将乳汁中的细胞破坏后,根据释放出的DNA沉淀或凝块的数量间接判断细胞数目多少的方法。据此原理还衍生出了Wisonsin乳房炎测试法(WMT)、Michigan乳房炎测试法(MMT)、兰州乳房炎测试法(LMT)等等改进方法。此外还有应用表面活性剂配方制成的SMT系列诊断液。总体来说,这一类方法操作简单,诊断迅速,成本较低,但缺点是结果判定的主观性较强,容易出现主观误差。


2微生物学检测   对乳汁的病原微生物进行分离培养和鉴定,并与患牛的临床症状和乳汁的性状结合起来,判定乳房炎的发生情况。如在乳汁中分离到无乳链球菌、金黄葡萄球菌、大肠杆菌或霉形体时,就要注意这些病原可能与牛群的乳房炎发生有关系。但需要指出的是,有些隐性乳房炎不能在乳汁中检出病原菌,而有些病原菌经常存在于乳房内,检出时牛只不一定发病。因此根据乳汁中有无病原菌来判断奶牛是否患有乳房炎需要综合分析。


3乳汁理化性质的检测


3.1乳汁pH值检查法

研究证实当发生乳房炎时,乳汁的PH值升高,升高的程度取决与炎症的程度。因此通过检测乳汁pH值的方法可以检测乳房炎。常用的方法有溴麝香草酚蓝试验(BTB)法和乳房炎试纸法。


3.2乳汁导电性检查法    当奶牛发生乳房炎是,其乳汁中的离子浓度升高,进而表现为导电性的增加,因此,通过检测牛奶导电性的变化可以用于乳房炎的诊断。但不同的个体及不同的饲养管理状况,乳汁电导率变化较大,因此判断隐性乳房炎的关键是确定不同牛群正常乳汁的阈值。目前国内外有很多基于这一原理的奶牛乳房炎电子诊断仪,实现对奶牛乳房炎及牛奶形状的快速、综合检查。


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